G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 15/10 (2006.01) C12M 1/34 (2006.01) C12M 3/00 (2006.01) C12N 5/076 (2010.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2518882
Apparatus and methods for analyzing particles, including apparatus and methods for a sperm sorting process including: collecting sperm from an animal (30); selecting staining conditions (47A); staining the sperm with DNA selective fluorescent dye (48); sorting the sperm cells according to sex chromosome content (55); and cryopreserving a population of sorted sperm (61) until used for artificial insemination. One embodiment includes apparatus (1001) and methods for using a plurality of flow cytometry units (9) sharing an integrated platform to sort sperm cells. In one embodiment, flow cytometric sorting includes use of the following apparatus and methods: an orienting nozzle having a baffle (101); an epi-illumination optics system (109); slit scanning of localized DNA regions within cell nuclei (225); digital signal processing, including synchronous sampling of analog output signals (701), pulse waveform (497) feature extraction of an approximation of a first order derivative of a pulse waveform (497) at a point of the pulse, any of various sort strategies; and an automated sort calibration system (4201). In one embodiment, digital signal processing includes sampling analog output signals (701) at times relative to emission of pulses from an illumination laser. Other embodiments are substantially different from the foregoing, including embodiments directed to individual steps or systems that can be used for any of various applications involving particle analysis.
L'invention concerne des dispositifs et des procédés permettant d'analyser des particules, y compris des dispositifs et des procédés de tri de sperme consistant : à collecter du sperme d'un animal (30) ; à sélectionner des conditions de coloration (47a) ; à colorer le sperme avec un colorant fluorescent ADN-sélectif (48) ; à trier les cellules spermatiques en fonction de la teneur en chromosomes sexuels (55) ; et à cryoconserver une population de sperme trié (61) jusqu'à son utilisation pour une insémination artificielle. Un mode de réalisation comprend un dispositif (1001) et des procédés permettant d'utiliser une pluralité d'unités de cytométrie de flux (9) partageant une plate-forme intégrée pour trier les cellules spermatiques. Dans un autre mode de réalisation, le tri cytométrique de flux consiste à utiliser les dispositifs et les procédés suivants : un embout orienteur comprenant une chicane (101) ; un système optique à éclairage vertical (109) ; à balayer par une fente les régions d'ADN localisées dans le noyau cellulaire (225) ; à réaliser un traitement numérique du signal, comprenant un échantillonnage synchrone de signaux de sortie analogiques (701), une extraction de caractéristiques de forme d'impulsion (497) d'une approximation d'une dérivée de premier ordre d'une forme d'impulsion (497) à un point de l'impulsion, ainsi que diverses stratégies de tri ; ainsi qu'un système d'étalonnage de tri automatisé (4201). Dans un autre mode de réalisation, le traitement numérique du signal consiste à échantillonner les signaux de sortie analogiques (701) à des instants données par rapport à l'émission d'impulsions par un laser éclairant. L'invention concerne également d'autres modes de réalisation sensiblement différents de ceux déjà cités, se rapportant à des étapes ou à des systèmes individuels pouvant être utilisés pour diverses applications nécessitant une analyse particulaire.
Anzar Muhammad
Crowley Kathleen S.
Didion Bradley
Durack Gary
Graham Jeffrey A.
Inguran Llc
Mcfadden Fincham
Monsanto Technology Llc
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2073073