Cell-based assay for immunodeficiency virus infectivity and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/70 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) G01N 33/567 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2331760

Methods and reagents for the capture of primary HIV are provided. A cell line expressing CCR5, CXCR4 and CD4 receptors binds and is infected by primary HIV. The cell line contains a marker gene sequence, the marker gene sequence expressed in near linear quantities over at least two orders of magnitude in response to HIV infection. Primary HIV is amplified to create a primary virus stock through insertion of an amplicon gene into the receptor expressing cell line. HIV amplification occurs rapidly and is operative with noninfectious HIV through amplification in the presence of an infectivity complement. The present invention is useful in determining host HIV titer, drug sensitivity, HIV amplification, gene sequencing and co-receptor utilization.

L'invention concerne des méthodes et des réactifs permettant de détecter une primo-infection à VIH. Une lignée cellulaire exprimant les récepteurs CCR5, CXCR4, et CD4 est liée et infectée par le VIH primaire. La lignée cellulaire contient une séquence de gènes marqueurs, la séquence de gènes marqueurs exprimée en quantités quasi-linéaires sur au moins deux ordres de grandeur en réaction à une infection à VIH. Le VIH primaire est amplifié pour créer un stock de virus primaires par insertion d'un gène amplicon dans le récepteur exprimant la lignée cellulaire. L'amplification du VIH, qui se produit rapidement, peut être réalisée avec un VIH non-infectieux par amplification en présence d'un complément d'infectivité. La présente invention sert à déterminer le titre du VIH hôte, la sensibilité aux médicament, l'amplification du VIH, le séquençage des gènes et l'utilisation des co-récepteurs.

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