Characterising polypeptides

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – D

Patent

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Details

C07D 295/26 (2006.01) C07K 1/107 (2006.01) C07K 1/12 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2449681

Provided is a method for characterising a polypeptide or a population of polypeptides, which method comprises the steps of : (a) optionally reducing disulphide linkages in the polypeptides, if they are present and capping free thiols in the polypeptides, if they are present; (b) contacting a sample comprising one or more polypeptides with a cleavage reagent which cleaves one or more polypeptides on the C-terminal side of a lysine residue to produce peptide fragments; (c) optionally deactivating the cleavage reagent; (d) contacting the sample with a lysine reactive agent to cap .epsilon.-amino groups; (e) removing those peptides having capped .epsilon.-amino groups; and (f) recovering the C-terminal peptides.

La présente invention concerne une méthode de caractérisation d'un polypeptide ou d'une population de polypeptides. Ladite méthode consiste à: (a) éventuellement réduire les liaisons disulfures présentes dans les polypeptides, le cas échéant, et coiffer des thiols libres présents dans les polypeptides, le cas échéant ; (b) mettre en contact un échantillon comprenant un ou plusieurs polypeptides avec un réactif de dissociation qui dissocie un ou plusieurs polypeptides sur le côté C-terminal d'un résidu de lysine pour produire des fragments de peptides; (c) éventuellement désactiver le réactif de dissociation; (d) mettre en contact l'échantillon avec un agent réactif de la lysine pour coiffer des groupes .epsilon.-amino; (e) éliminer lesdits peptides présentant des groupes .epsilon.-amino coiffés; et (f) récupérer les peptides C-terminaux.

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