C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
H
C07H 21/00 (2006.01) B01D 57/02 (2006.01) C07H 1/08 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) G01N 27/447 (2006.01)
Patent
CA 2318973
An electrophoretic method for purifying a nucleic acid sample is disclosed. The method generally comprises the steps of (1) providing a nucleic acid sample comprising a desired nucleic acid and one more contaminants, (2) providing an electrophoresis matrix having a loading well and a recovery well formed therein, (3) placing the nucleic acid sample into the loading well, (4) performing a first electrophoresis comprising electrophoresing the nucleic acid sample for a first time effective to transport the desired nucleic acid out of the loading well and into the electrophoresis matrix; and (5) performing a second electrophoresis comprising electrophoresing the nucleic acid sample for a second time effective to transport the desired nucleic acid out of the electrophoresis matrix and into the recovery well. According to the method, the first and second electrophoresis steps are effective to substantially reduce the concentration of contaminants relative to the concentration of desired nucleic acid in the nucleic acid sample, thereby producing a purified nucleic acid. In the method, the loading and recovery wells may be the same or different, and the electric fields may be DC or alternating. Also disclosed is a preparative electrophoresis method employing an alternating electrical field.
Cette invention a trait à une technique de purification d'échantillon d'acide nucléique par électrophorèse. Cette technique comporte les opérations suivantes: (1), confectionner un échantillon d'acide nucléique renfermant l'acide nucléique désiré et comprenant un ou plusieurs contaminants, (2), mettre en place une matrice pour électrophorèse possédant une cupule de chargement et une cupule de récupération, (3), placer l'échantillon d'acide nucléique dans la cupule de chargement, (4), effectuer une première électrophorèse consistant à soumettre à celle-ci l'échantillon d'acide nucléique pendant un délai suffisant pour transférer l'acide nucléique désiré de la cupule de chargement dans la matrice à électrophorèse et, (5), effectuer une seconde électrophorèse consistant à soumettre à celle-ci l'échantillon d'acide nucléique pendant un délai suffisant pour transférer l'acide nucléique désiré de la matrice dans la cupule de récupération. Dans le cadre de cette technique, les deux électrophorèses permettent de réduire de manière notable la teneur en contaminants relativement à la concentration de l'acide nucléique désiré dans l'échantillon d'acide nucléique, ce qui permet d'obtenir un acide nucléique purifié. Les cupules de chargement et de récupération utilisées lors de la mise en oeuvre de cette technique peuvent être identiques ou différentes et les champs électrique en courant continu ou en courant alternatif. L'invention porte également sur une technique d'électrophorèse préparative utilisant du courant alternatif pour le champ électrique.
Chiesa Claudia
Drouin Guy
Efcavitch J. William
Mayer Pascal
O'neill Roger
Applera Corporation
Perkin-Elmer Corporation The
Sim & Mcburney
University Of Ottawa
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1763582