C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2691647
This invention relates to the amplification of multiple nucleic acid target sequences. Forward and reverse compound primers comprising a common amplification sequence and a target-specific primer sequence are immobilised at a site on a solid support. Target regions of single-stranded template DNA are primed and copied by the forward primer to produce a first extension product. The template DNA is removed and the first extension product is primed and copied by the reverse primer to produce a second extension product. The second extension product has common amplification sequences at each end and is bulk-amplified in solution by regular PCR employing primers that target the common amplification sequences. These methods allow highly multiplexed amplifications to be performed.
L'invention concerne l'amplification de multiples séquences cibles d'acide nucléique. Des amorces composées sens et antisens comprenant une séquence d'amplification commune et une séquence d'amorce spécifique de cible sont immobilisées sur un site sur un support solide. Les régions cibles de matrice d'ADN monocaténaire sont amorcées et copiées par l'amorce sens pour produire un premier produit d'extension. La matrice d'ADN est supprimée et le premier produit d'extension est amorcé et copié par l'amorce antisens afin de produire un deuxième produit d'extension. Le deuxième produit d'extension comporte des séquences d'amplification communes à chaque extrémité, et est amplifié en masse en solution par PCR normale à l'aide d'amorces qui ciblent les séquences d'amplification communes. Ces procédés permettent de mettre en uvre des amplifications en multiplex élevé.
Benoit & Cote Associes Inc.
University Of Leicester
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1390220