Metabolically engineered microbial cell comprising a...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/52 (2006.01) C12N 1/18 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/06 (2006.01) C12N 15/53 (2006.01) C12P 1/00 (2006.01) C12P 7/06 (2006.01) C12P 7/20 (2006.01) C12P 7/56 (2006.01)

Patent

CA 2379034

The present invention concerns a microbial cell comprising a first expressible enzyme activity, e.g., pyridine nucleotide transhydrogenase from Azotobacter vinelandii which, when expressed in said microbial cell, is controlling an intracellular redox system of said cell, said first expressible enzyme activity in said microbial cell being operably linked to an expression signal not natively associated with said first expressible enzyme activity. The expression of said first expressible enzyme activity is operably linked to an increased production of a first metabolite. The cell is preferably a yeast cell and may also comprise a further expressible enzyme activity, e.g., glutamate synthase and/or glutamine synthetase, said further expressible enzyme activity, when expressed, mediating a first biosynthetic reaction resulting in production of a first metabolite, said further expressible enzyme activity, when expressed at an increased level, resulting in an increased production of said first metabolite, said increased expression of said further expressible enzyme activity and/or said increased production of said first metabolite being operably linked to an increased expression of said first expressible enzyme activity. There is also provided a microbial cell wherein said expression of said first expressible enzyme activity is operably linked to an increased production of a first metabolite and a decreased production of a second metabolite. Cells according to the invention are useful in the production of a metabolite such as ethanol or glycerol.

L'invention concerne une cellule microbienne comprenant une première activité d'enzyme exprimable, p.ex., transhydrogénase pyridine nucléotide provenant de Azotobacter vinelandii, qui, exprimée dans ladite cellule microbienne, régule le système rédox intracellulaire de cette cellule, ladite première activité d'enzyme exprimable dans cette cellule microbienne étant liée de manière fonctionnelle à un signal d'expression non associé de manière native avec cette première activité d'enzyme exprimable. L'expression de la première activité d'enzyme exprimable est liée de manière fonctionnelle à la production d'un premier métabolite. La cellule, qui est de préférence une cellule de levure, peut également comprendre une autre activité d'enzyme exprimable, p.ex., glutamate synthase et/ou glutamine synthétase, cette activité d'enzyme exprimable servant de médiateur, quand elle est exprimée, d'une première réaction biosynthétique qui débouche sur la production d'un premier métabolite, ladite plus grande activité d'enzyme exprimable et/ ou ladite production plus importante dudit premier métabolite étant liées de manière fonctionnelle à l'augmentation de l'expression de la première activité d'enzyme exprimable. L'invention concerne également une cellule microbienne dans laquelle l'expression plus importante de la première activité d'enzyme est liée de manière fonctionnelle à une production plus importante d'un premier métabolite et à une production moins importante d'un deuxième métabolite. Les cellules de la présente invention sont utiles dans la production d'un métabolite tel qu'éthanol ou glycérol.

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