C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
Patent
CA 2666448
A living cell of a microorganism in a sample can be detected by the following steps a) to h): a): adding a crosslinking agent to the sample, wherein the crosslinking agent is capable of crosslinking DNA upon being irradiated with light having a wavelength of 350 to 700 nm; b) irradiating the sample containing the crosslinking agent with light having a wavelength of 350 to 700 nm; c) removing the crosslinking agent from the light-irradiated sample; d) adding a culture medium to the sample from which the crosslinking agent has been removed, and incubating the mixture; e) adding a crosslinking agent to the incubated sample, wherein the crosslinking agent is capable of crosslinking DNA upon being irradiated with light having a wavelength of 350 to 700 nm; f) irradiating the sample containing the crosslinking agent with light having a wavelength of 350 to 700 nm; g) extracting DNA from the sample, and amplifying a target region in the extracted DNA by a nucleic acid amplification method; and h) analyzing an amplification product.
Selon l'invention, une cellule vivante d'un microorganisme dans un échantillon peut être détectée par les étapes a) à h) consistant : a) à ajouter un agent réticulant à l'échantillon, l'agent réticulant étant capable de réticuler l'ADN lorsqu'il est irradié par de la lumière ayant une longueur d'onde de 350 à 700 nm ; b) à irradier l'échantillon contenant l'agent réticulant par de la lumière ayant une longueur d'onde de 350 à 700 nm ; c) à éliminer l'agent réticulant de l'échantillon irradié par la lumière ; d) à ajouter un milieu de culture à l'échantillon duquel l'agent réticulant a été éliminé et à faire incuber le mélange ; e) à ajouter un agent réticulant à l'échantillon incubé, l'agent réticulant étant capable de réticuler l'ADN lorsqu'il est irradié par de la lumière ayant une longueur d'onde de 350 à 700 nm ; f) à irradier l'échantillon contenant l'agent réticulant par de la lumière ayant une longueur d'onde de 350 à 700 nm ; g) à extraire l'ADN de l'échantillon et à amplifier une région cible dans l'ADN extrait par une méthode d'amplification d'acide nucléique ; et h) à analyser un produit d'amplification.
Soejima Takashi
Yoshida Shinichi
Morinaga Milk Industry Co. Ltd.
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
LandOfFree
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