C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/02 (2006.01)
Patent
CA 2747836
The invention relates to a method for verifying and/or identifying hormonally effective substances using the pheromone system of yeast, to yeast cells for carrying out the method, and to the use thereof. The method according to the invention comprises the following steps: a) adding yeast culture medium or buffer to a sample which presumably contains a hormonally effective substance, b) thereafter contacting the sample with haploid yeast cells that possess features 1 through 3: 1. the DNA sequence coded for a heterologous hormone receptor is placed under the control of a constitutive promoter, 2. the DNA sequence coded for a yeast pheromone is placed under the control of a promoter that can be regulated by the hormone receptor, 3. a gene that is coded for a receptor for the yeast pheromone is constitutively expressed, wherein the activation of the hormone receptor by the hormonally effective substance leads to the expression and secretion of the yeast pheromone, and c) the physiological and/or morphological changes of haploid yeast cells are detected.
L'invention porte sur un procédé de criblage et/ou d'identification de substances à activité hormonale avec utilisation du système de phéromones de levures, sur des cellules de levure pour la conduite du procédé, et sur leur utilisation. Le procédé selon l'invention comprend les étapes suivantes : a) un échantillon, qui comprend de façon supposée une substance à activité hormonale, est additionné d'un milieu de culture de levure ou d'un tampon, b) l'échantillon est ensuite mis en contact avec des cellules de levures haploïdes, qui ont les caractéristiques 1 à 3 : 1. la séquence d'ADN codant pour un récepteur hormonal hétérologue est placée sous le contrôle d'un promoteur constitutif, 2. la séquence d'ADN codant pour une phéromone de levure est placée sous le contrôle d'un promoteur apte à être régulé par le récepteur hormonal, 3. un gène, qui code pour un récepteur pour le phéromone de levure, est exprimé de façon constitutive, l'activation du récepteur hormonal par la substance à activité hormonale conduisant à l'expression et à la sécrétion de la phéromone de levure, et c) les modifications physiologiques et/ou morphologiques des cellules de levures haploïdes sont répertoriées.
Diel Patrick
Groß Annett
Lehmann Sylvi
Ostermann Kai
Rataj Felicitas
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1676160