Method of isolating secretion signals in lactic acid...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/74 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)

Patent

CA 2381184

A method of identifying nucleotide sequences coding for signal peptides in lactic acid bacteria, using a DNA molecule comprising a transposon including a promoterless reporter gene from which DNA molecule a region between the LR and the reporter gene is deleted and the DNA molecule comprises a DNA sequence coding for a secretion reporter molecule. By deleting the region between the LR and the reporter gene, stop codons in-frame with the secretion reporter molecule is removed which upon transposition permits translational fusions from upstream the LR.

L'invention concerne un procédé d'identification de séquences nucléotidiques codant pour des peptides signaux dans des bactéries d'acide lactique, qui utilise une molécule d'ADN contenant un transposon qui inclut un gène rapporteur sans promoteur ; une région de cette molécule d'ADN, située entre l'extrémité terminale gauche et le gène rapporteur, est délétée et la molécule d'ADN comporte une séquence d'ADN codant pour une molécule rapporteur de sécrétion. La délétion de la région située entre l'extrémité terminale gauche et le gène rapporteur permet d'éliminer les codons de terminaison situés dans le même cadre de lecture que la molécule rapporteur de sécrétion, ce qui, au cours d'une transposition, permet des fusions traductionnelles à partir d'une région située en aval de l'extrémité terminale gauche.

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