Methods for identifying genetic determinants associated with...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2327830

Disclosed are methods for identifying genetic determinants that modulate the activity of test compounds which affect detectable processes in eukaryotic cells. The process comprises exposing a first cell, whether prokaryotic or eukaryotic, to a test compound to determine if the test compound modulates the detectable process in the cell. If so, the compound is then exposed to a second pool of cells (preferably of the same type as the first pool of cells) which overexpress one or more heterologous polypeptides under conditions which, in the absence of the compound, allow the detectable process to occur. If overexpression of the heterologous polypeptide alters modulation of the detectable process, such modulation allows the detectable process to be correlated with the test compound or with a particular compound and the overexpressed heterologous polypeptide, and the gene encoding the same. Also described are methods for correlating a gene with a detectable cellular process, wherein a first pool of cells, whether prokaryotic or eukaryotic, is exposed to a test compound, determining if the test compound modulates a detectable process in the cells, and if so, exposing the compound to a second pool of cells (preferably of the same type as the first pool of cells) which overexpress a heterologous polypeptide. If overexpression of the heterologous polypeptide alters modulation of the detectable process in the cells by the compound, the heterologous polypeptide responsible for such modulation, and preferably the nucleic acid molecule encoding the same, are characterized and correlated with the detectable process.

L'invention concerne des procédés d'identification de déterminants génétiques modulant l'activité de composés de test qui affectent des procédés décelables dans les cellules eucaryotes. Le procédé consiste à exposer une première cellule, procaryote ou eucaryote, à un composé de test pour déterminer si le composé de test module le procédé décelable dans la cellule. Le cas échéant, le composé est exposé à un second groupe de cellules (de préférence du même type des celles du premier groupe ) exprimant en excès un ou plusieurs polypeptides hétérologues dans des conditions qui, en l'absence du composé, permettent au procédé décelable d'avoir lieu. Si l'expression excessive des polypeptides hétérologues modifie la modulation du procédé décelable, cette modulation permet la corrélation du procédé décelable avec le composé de test ou avec un composé particulier et le polypeptide hétérologue exprimé en excès et le gène codant pour celui-ci. Font aussi l'objet de cette invention des procédés de mise en corrélation d'un gène avec un procédé cellulaire décelable, dans lequel un premier groupe de cellules, procaryotes ou eucaryotes, est soumis à un composé de test, dans le but de déterminer si le composé de test module un procédé décelable dans les cellules et, le cas échéant, le composé est soumis à un second groupe de cellules (de préférence du même type de celles du premier groupe ) qui expriment en excès un polypeptide hétérologue. Si l'expression excessive du polypeptide hétérologue modifie la modulation du procédé décelable dans les cellules par le composé, le polypeptide hétérologue impliqué dans cette modulation et, de préférence la molécule d'acide nucléique codant pour celui-ci, sont caractérisés et mis en corrélation avec le procédé décelable.

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