Methods for quantifying nuclear run-on transcriptional assays

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2458970

The present invention relates generally to a method for the detection of genetic expression in cells. More particularly, the present invention is directed to a method of monitoring the transcriptional activity of genetic elements including genes in a cell and more particularly to a method of determining at a quantitative, semi-quantitative or qualitative level the transcriptional activity of selected genetic elements in a cell. The present invention is further directed to a method for analyzing run-on transcription in cells and cellular organelles such as nuclei, mitochondria and/or chloroplasts. The present invention further contemplates the use of real-time detection analysis in an amplification assay for the determination of run-on transcription in a cell and/or cellular organelles such as nuclei, mitochondria and/or chloroplasts. The present invention further provides a kit including components of or for a kit, preferably packaged for sale with instructions for use, in the determination of the level of run-on transcription in a cell or cellular organelles such as nuclei, mitochondria and/or chloroplasts. The method of the present invention provides, therefore, a sensitive method for the determination of genetic expression in a cell which is rapid and cost effective.

L'invention concerne généralement un procédé pour la détection d'une expression génétique dans des cellules. En particulier, l'invention concerne un procédé de surveillance de l'activité transcriptionnelle d'éléments génétiques, y compris des gènes, dans une cellule, et en particulier, un procédé de détermination, à un niveau quantitatif, semi-quantitatif ou qualitatif, de l'activité transcriptionnelle d'éléments génétiques sélectionnés dans une cellule. L'invention concerne également un procédé permettant d'analyser une transcription par run-on dans des cellules et dans des organites cellulaires, tels que des noyaux, des mitochondries et/ou des chloroplastes. L'invention concerne également l'utilisation d'une analyse de détection en temps réel, dans un essai d'amplification, pour déterminer une transcription par run-on dans une cellule et/ou dans des organites cellulaires, tels que des noyaux, des mitochondries et/ou des chloroplastes. L'invention concerne également une trousse comprenant des composants d'une trousse ou pour une trousse, de préférence emballés pour la vente avec un mode d'emploi, pour la détermination du niveau de transcription par run-on dans une cellule ou dans des organites cellulaires, tels que des noyaux, des mitochondries et/ou des chloroplastes. Le procédé de l'invention constitue par conséquent un procédé sensible pour la détermination d'une expression génétique dans une cellule, lequel procédé étant rapide et peu onéreux.

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