G - Physics – 02 – B
Patent
G - Physics
02
B
G02B 21/00 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01)
Patent
CA 2231222
A laser scanning micrsocope (10) produces molecular excitation in a target material (14) by simultaneous absorption of three or more photons to thereby provide intrinsic three-dimensional resolution. Fluorophores having single photon absorption in the short (ultraviolet or visible) wavelength range are excited by a beam (16) of strongly focused subpicosecond pulses of laser light of relatively long (red or infrared) wavelength range. The fluorophores absorb at about one third, one fourth or even smaller fraction of the laser wavelength to produce fluoroscent images of living cells and other microscopic objects. The fluoroscent emission from the fluorophores increases cubicly, quarticly or even higher power law with the excitation intensity so that by focusing the laser light, fluorescence as well as photobleaching are confined to the vicinity of the focal plane. This feature provides depth of field resolution comparable to that produced by confocal laser scanning microscopes, and in addition reduces photobleaching and phototoxicity.
Un microscope laser à balayage (10) produit une excitation moléculaire dans une matière cible (14) par absorption simultanée de trois photons ou plus pour produire ainsi une définition intrinsèque en trois dimensions. Des fluorophores à absorption monophotonique dans la plage des longueurs d'onde courtes (ultraviolet ou visible) sont excités par un faisceau ('16) d'impulsions subpicoseconde fortement concentrées de lumière laser dans la plage des longueurs d'onde relativement longues (rouge ou infrarouge). Les fluorophores absorbent à environ un tiers, un quart et voire même moins de la longueur d'onde du laser pour produire des images fluorescentes de cellules vivantes et d'autres objets microscopiques. L'émission fluorescente des fluorophores augmente de manière cubique, quartique ou même selon une loi exponentielle supérieure avec l'intensité de l'excitation de sorte que par la concentration de la lumière laser, la fluorescence ainsi que le photoblanchiment sont confinés à proximité du plan focal. Cette caractéristique permet de produire une définition de la profondeur de champ comparable à celle produite par les microscopes laser confocaux à balayage, et de réduire le photoblanchiment et la phototoxicité.
Webb Watt W.
Xu Chris
Cornell Research Foundation Inc.
Macrae & Co.
LandOfFree
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