Nanoparticle probes with raman spectroscopic fingerprints...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/65 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/553 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2483697

The invention encompasses reagents comprising particles with at least one Raman dye and a specific binding members bound thereto and methods of using such reagents. The invention also encompasses reagents of a specific binding member and two or more different Raman dyes and methods for using such reagents. New types of particle probes having a specific binding member bound thereto are described. These reagents are used in a novel detection strategy that utilizes the catalytic properties of the Au nanoparticles to generate a silver coating that can behave as a surface-enhanced Raman scattering (SERS) promoter for the dye-labeled particles that have been captured by target and an underlying chip in microarray format. The strategy provides the high sensitivity and high selectivity attributes of grey-scale scanometric detection but provides a route to multiplexing and ratioing capabilities since a very large number of probes can be designed based upon the concept of using a Raman tag as a spectroscopic fingerprint in detection. These spectra are used as fingerprints to differentiate oligonucleotide or other targets in one solution. This method has been used to distinguish six dissimilar DNA targets with six Raman labeled nanoparticle probes, and also two RNA targets with single nucleotide polymorphisms (SNPs).

La présente invention concerne des réactifs qui comprennent des particules comportant au moins un colorant Raman et un organe de liaison spécifique lié à ce dernier, et des procédés d'utilisation desdits réactifs. L'invention se rapporte également à des réactifs composés d'un organe de liaison spécifique et d'au moins deux colorants Raman différents, et à des procédés d'utilisation desdits réactifs. L'invention concerne aussi de nouveaux types de particules sondes auxquelles est lié un organe de liaison spécifique. Les réactifs de l'invention sont utilisés dans une nouvelle stratégie de détection qui fait appel aux propriétés catalytiques de nanoparticules d'Au pour produire un revêtement d'argent pouvant se comporter comme un promoteur de diffusion Raman exaltée de surface (SERS) pour les particules marquées par le colorant qui ont été capturées par une cible, et à une puce sous-jacente au format de microréseau. Le procédé de l'invention confère les qualités de sensibilité et de sélectivité élevées de la détection scanométrique de l'échelle des gris, mais il offre également des fonctionnalités de multiplexage et de calcul de rapports étant donné qu'il est possible de concevoir un très grand nombre de sondes en utilisant un marqueur Raman comme empreinte spectroscopique pour la détection. On utilise ces spectres comme empreintes afin de différencier les oligonucléotides ou d'autres cibles dans une solution. Ce procédé a été utilisé pour distinguer six cibles ADN différentes au moyen de six nanoparticules sondes à marqueurs Raman, et également deux cibles ARN présentant des polymorphismes d'un seul nucléotide (SNP).

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