Non-separation specific binding chemiluminescent assay

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/553 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2224825

The assay described herein is predicated on an observation that when acridinium ester labeled tracers are bound to their corresponding binding conjugate immobilized on a metal oxide solid phase, the measurable chemiluminescent light emission of the labeled tracer bound to the solid phase is quenched as compared to the free fraction tracer that is unattached to the solid phase. According to the invention, a non-separation specific binding assay to detect or quantify the presence of an analyte is provided where the entire reaction mixture is flashed (including unreacted tracer) and modulated signal (because of the quench effect) is associated with a reference, thus determining the amount or presence of said analyte in said sample. Disadvantages inherent in heterogeneous assays employing multiple separations may be avoided using this non-separation method.

Le procédé de dosage de la présente invention s'appuie sur l'observation que, lorsque des marqueurs portant comme marque un ester à fonction acridinium sont fixés à leur conjugué de liaison correspondant immobilisé sur la phase solide d'un oxyde métallique, l'émission mesurable de lumière par chimioluminescence du marqueur portant la marque et fixé à la phase solide est étouffée par comparaison au marqueur à fraction libre qui n'est pas attaché à la phase solide. L'invention permet donc un dosage par fixation spécifique et sans fractionnement détectant ou quantifiant la présence d'un analyte. Pour cela, le mélange de réaction entier (y compris le produit de marquage n'ayant pas réagi) est rendu luminescent, et l'association d'un signal modulé (résultant de l'effet d'étouffement) à une référence permet de déterminer la quantité ou la présence de l'analyte dans l'échantillon. Ce procédé sans fractionnement évite les inconvénients inhérents aux dosages hétérogènes employant de multiples fractionnements.

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