Novel yeast mutants and process for producing glycoprotein...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 1/19 (2006.01) C12N 9/24 (2006.01) C12P 19/18 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2382184

Novel yeast variants capable of producing a glycoprotein wherein a sugar chain having the same sugar chain structure as a sugar chain produced by mammalian cells is attached to an asparagine residue of a protein; and a process for producing the sugar chain and the glycoprotein by a sugar chain engineering technique with the use of these variants. By using the auxotrophic triplex or tetraplex variant newly bred, a neutral sugar chain identical with the high- mannose type produced by mammalian cells (human cells, etc.) or a glycoprotein having the same neutral sugar chain can be efficiently produced at a high purity. By transferring a mammalian type sugar chain biosynthesis-associated gene into such a variant, it is also possible to efficiently produce a mammalian sugar chain of high-mannose type, hybrid type, complex type, etc. or a protein having a mammalian type sugar chain.

L'invention concerne des nouvelles variantes de levure capables de produire une glycoprotéine, dans lesquelles une chaîne de sucre présentant la même structure qu'une chaîne produite par des cellules mammaliennes est fixée à un reste asparagine d'une protéine ; et un procédé de production de la chaîne de sucre et de la glycoprotéine par une technique de traitement de chaîne de sucre à l'aide de ces variantes. Au moyen de la variante auxotrophe triplex ou tétraplex modifiée selon le procédé de l'invention, une chaîne de sucre identique riche en mannose, produite par des cellules mammaliennes (cellules humaines, etc) ou une glycoprotéine possédant la même chaîne de sucre neutre, peut être produite efficacement avec un degré de pureté élevé. Par le transfert d'un gène associé à la biosynthèse de la chaîne de sucre de type mammalien dans la variante de l'invention, il est également possible de produire efficacement une chaîne de sucre mammalienne riche en mannose, de type hybride, complexe, etc., ou une protéine possédant une chaîne de sucre mammalienne.

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