Primers, probes and methods for nucleic acid amplification

Details Primers, probes and methods for nucleic acid amplification Primers, probes and methods for nucleic acid amplification

C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2584569

Homogenous detection during or following PCR amplification, preferably LATE- PCR, utilizing fluorescent DNA dye and indirectly excitable labeled primers and probes, improves reproducibility and quantification. Low-temperature homogeneous detection during or following non-symmetric PCR amplification, preferably LATE-PCR, utilizing fluorescent DNA dye and indirectly excitable labeled mismatch-tolerant probes permits analysis of complex targets. Sequencing sample preparation methods following LATE-PCR amplifications reduce complexity and permit ~single-tube~ processing.

L'invention porte sur une détection homogène pendant ou suivant l'amplification PCR, de préférence LATE-PCR, au moyen d'un colorant d'ADN fluorescent et d'amorces et de sondes étiquetées indirectement excitables, qui améliore la reproductibilité et la quantification. Une détection homogène à basse température pendant ou suivant une amplification PCR non symétrique, de préférence LATE-PCR, faisant appel à un colorant d'ADN fluorescent et à des sondes étiquetées tolérantes aux mésappariements indirectement excitables permet l'analyse de cibles complexes. L'invention concerne également des procédés de préparation d'échantillons par séquençage après les amplifications LATE-PCR, qui permettent de réduire la complexité et d'effectuer un traitement "en un seul tube".

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