Process for producing fusion proteins comprising scfv...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/62 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C07K 16/26 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) C12N 15/56 (2006.01) C12N 15/80 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01) G01N 33/76 (2006.01)

Patent

CA 2162878

The present invention provides a process for producing fusion proteins comprising ScFv fragments by a transformed Aspergillus mould containing a DNA sequence encoding the ScFV fragment under control of at least one expression and/or secretion regulating region derived from a mould selected from the group consisting of promoter sequences, terminator sequences and signal sequence-encoding DNA sequences or functional derivatives or analogues thereof. Such regulating region can be derived from the endoxylanase II gene (exlA gene) of Aspergillus niger var. awamori present on plasmid pAW14B or can be the combination of both a promoter and a signal sequence-encoding DNA sequence derived from a glucoamylase gene ex Aspergillus plus a terminator sequence of a trpC gene ex Aspergillus. Preferably a fusion protein comprising "secreted mould protein - (KEX2 -) ScFv" is produced. Also provided are new products comprising an ScFv fragment or fusion product thereof, compositions, e.g. consumer products, containing both old and new products so produced. Preferably the ScFv fragment recognizes a compound present in the human eco-system, such as microorganisms or enzymes. Such compounds can be present in the oral cavity, e.g. involved in the formation of plaque, caries, gingivitis, periodontal diseases, or bad breath, or on the human skin, e.g. involved in the formation of malodour, inflammation or hair loss, or can be a hormone, e.g. HCG.

L'invention concerne un procédé de production de protéines de fusion comprenant des fragments d'anticorps monocaténaires ScFv au moyen d'un moule d'Aspergillus transformé contenant une séquence d'ADN codant le fragment de ScFv sous contrôle d'au moins une région de régulation de sécrétion et/ou d'expression dérivée d'un moule choisi dans le groupe constitué de séquences promotrices, de séquences de terminaison et de séquences d'ADN codant les séquences de signaux, des dérivés fonctionnels ou des analogues de ces derniers. Ladite région de régulation peut être dérivé du gène de l'endoxylanase II (gène axlA) de l'aspergillus niger var. awamori présent sur le plasmide pAW14B, ou peut être le résultat de la combinaison d'une séquence promotrice et d'une séquence d'ADN codant une séquence de signaux dérivée du gène de glucoamylase ex Aspergillus et d'une séquence de terminaison d'un gène de trpC ex (Aspergillus). Une protéine de fusion comprenant un moule protéique sécrété - (KEX2 -) est de préférence produite. L'invention porte également sur de nouveaux produits comprenant un fragment de ScFv ou un produit de fusion de ce dernier, des compositions telles que des produits de consommation contenant des anciens et des nouveaux produits ainsi obtenus. Le fragment de ScFv reconnaît, de préférence, un composé présent dans l'écosystème humain tels que des microorganismes ou des enzymes. Lesdits composés peuvent être présents dans la cavité buccale et participer à la formation de la plaque dentaire, de caries, de gingivites et d'affections parodontales, à la mauvaise haleine, ou contribuer à la formation de mauvaises odeurs, sur la peau humaine, d'inflammation ou à la perte de cheveux, ou peut être une hormone telle que la gonadotrophine chorionique humaine.

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