C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/565 (2006.01)
Patent
CA 2548160
Provided is a process for purifying human interferon beta from a recombinant human interferon beta-containing culture comprising performing affinity chromatography and reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP- HPLC), wherein the affinity chromatography includes: adsorbing the interferon beta-containing culture to an equilibrated affinity chromatography column, followed by washing with an equilibration buffer solution; washing the column with a washing buffer solution A of pH 6.5-7.5 containing 30-60 wt% of propylene glycol and a washing buffer solution B of pH 6.5-7.5 containing 10- 30 wt% of propylene glycol and 1-2M NaCl; and eluting a human interferon beta- containing fraction with a buffer solution of pH 6.5-7.5 containing 40-60 wt% of propylene glycol and 1-2M NaCl.
L'invention concerne un procédé destiné à purifier un interféron bêta humain à partir d'une culture contenant un interféron bêta humain recombiné. Ce procédé consiste à réaliser une chromatographie d'affinité et une chromatographie liquide haute performance en phase inversée (RP-HPLC). La chromatographie d'affinité consiste à adsorber la culture contenant un interféron bêta vers une colonne de chromatographie d'affinité équilibrée, puis à réaliser un lavage avec une solution tampon d'équilibrage, à laver la colonne avec une solution tampon de lavage (A) présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 30 et 60 % en poids de propylène glycol et une solution tampon de lavage (B) présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 10 et 30 % en poids de propylène glycol et entre 1 et 2 M de NaCl, et à éluer une fraction contenant un interféron bêta humain avec une solution tampon présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5 et contenant entre 40 et 60 % en poids de propylène glycol et entre 1 et 3 M de NaCl.
Ahn Jee-Won
Baek Min-Ji
Chung Jong-Sang
Kim Ki-Wan
Lee Dong-Eok
Cj Cheiljedang Corporation
Cj Corporation
Ridout & Maybee Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2058955