Process of high purity albumin production

Details Process of high purity albumin production Process of high purity albumin production

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 14/765 (2006.01) C07K 1/16 (2006.01) C07K 1/18 (2006.01)

Patent

CA 2220923

A process is provided for the preparation of albumin which has extremely low levels of or is essentially free of colorants, metal ions, human proteins, host proteins, fragments of albumin, polymers or aggregates of albumin and viruses, and which is essentially non-glycated, relatively high in free thiol and with an intact C-terminus. The process comprises passing albumin (preferably expressed and secreted by transformed yeast) through positive mode cation exchange and then positive mode anion exchange chromatography. Other steps may also be employed, for example ultrafiltration, gel permeation chromatography, affinity chromatography binding the albumin (for example using blue dyes) and affinity chromatography binding contaminants (for example using an aminophenylboronic acid resin). Elution of albumin, with a compound having affinity for albumin, from a material having no specific affinity for albumin is also disclosed, as is removal of ammonium ions with a counter-ion.

L'invention porte sur un procédé de production d'albumine comportant des niveaux extrêmement faibles de colorants. d'ions métalliques, de protéines humaines, de protéines hôtes, de fragments d'albumine, de polymères ou d'agrégats d'albumine et de virus ou bien qui, dans une large mesure, en est exempte, n'est quasiment pas glycosylée et possède une teneur relativement élevée en thiol libre ainsi qu'un terminus carboxylique intact. Le procédé consiste à soumettre de l'albumine (exprimée et sécrétée, de préférence par une levure transformée) à une chromatographie d'échange de cation en mode positif puis à une chromatographie d'échange d'anions en mode positif. Il est également possible de passer par d'autres étapes comme l'ultrafiltration, la chromatographie par perméation sur gel, la chromatographie d'affinité fixant l'albumine (à l'aide de colorants bleus, par exemple) et la chromatographie d'affinité fixant des contaminants (en faisant appel, par exemple, à une résine d'acide aminophénylboronique). L'invention porte également sur l'élution d'albumine, à l'aide d'un composé présentant une affinité pour l'albumine, d'une substance n'ayant pas d'affinité spécifique pour l'albumine ainsi que sur l'élimination d'ions ammonium NH¿4? au moyen d'un contre-ion.

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