Pyruvate:nadp+ oxidoreductase and uses thereof

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 15/53 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)

Patent

CA 2419020

Provided are polynucleotides encoding Pyruvate:NADP+ oxidoreductases (PNO) as well as methods for obtaining the same. Furthermore, vectors comprising said polynucleotides are described, wherein the polynucleotides are operatively linked to expression control sequences allowing the expression in prokaryotic and/or eukaryotic host cells. In addition, polypeptides encoded by said polynucleotides, antibodies to said polypeptides and methods for their production are provided. Further described are methods for increasing the acetyl CoA synthesis as well as methods for the production of fatty acids, carotenoids, isoprenoids, vitamins, lipids, wax esters, (poly)saccharides and/or polyhydroxyalkanoates, or its metabolism products, in particular, steroid hormones, prostaglandin, cholesterol, triacylglycerols, bile acids or ketone bodies, comprising the expression of the polynucleotide or polypeptide described herein in a host cell or plant cell, plant tissue or plant. Methods for the identification of compounds being capable of activating or inhibiting PNO are described as well. Further, a pharmaceutical composition comprising the afore-mentioned inhibiting compounds and antibodies is described. Furthermore, transgenic plants, plant tissues, and plant cells containing the above described polynucleotides and vectors are described as well as the use of the mentioned polynucleotides, vectors, polypeptides, antibodies, and/or compounds identified by the method of the invention in the production of acetyl CoA metabolism products, e.g., fatty acids, carotenoids, isoprenoids, vitamins, lipids, (poly)saccharides, wax esters, and/or polyhydroxyalkanoates, and/or its metabolism products, in particular, steroid hormones, prostaglandin, cholesterol, triacylglycerols, bile acids and/or ketone bodies and pharmaceutical compositions.

La présente invention concerne des polynucléotides codant pour le Pyruvate: NADP+ (PNO) ainsi que des procédés d'obtention desdits polynucléotides. L'invention concerne également des vecteurs comprenant lesdits polynucléotides, dans lesquels les polynucléotides sont liés en fonctionnement à des séquences de contrôle d'expression permettant l'expression dans des cellules hôtes procaryotes et/ou eucaryotes. L'invention concerne en outre des polypeptides codés par lesdits polynucléotides, des anticorps auxdits polypeptides and leurs procédés de production. L'invention concerne encore des procédés permettant d'accroître la synthèse d'acétyl-CoA ainsi que des procédés de production d'acides gras, de caroténoïdes, d'isoprénoïdes, de vitamines, de lipides, des esters cireux, des (poly)saccharides et/ou des polyhydroxyalcanoates, ou ses produits de métabolisme, notamment des hormones stéroïdes, la prostaglandine, le cholestérol, les triacylglycérols, les acides biliaires ou les corps cétoniques, comprenant l'expression dudit polynucléotide ou polypeptide dans une cellule hôte ou une cellule végétale, dans un tissu végétal ou une plante. L'invention concerne aussi des procédés d'identification de composés capables d'activer ou d'inhiber les PNO. Par ailleurs, l'invention a trait à une composition pharmaceutique comprenant lesdits composés inhibiteurs et lesdits anticorps décrits plus haut. L'invention a aussi trait à des plantes transgéniques, des tissus végétaux et des cellules végétales contenant lesdits polynucléotides et lesdits vecteurs ainsi que l'utilisation des polynucléotides, des vecteurs, des polypeptides, des anticorps et/ou des composés identifiés par le procédé de l'invention dans la production de produits de métabolisme de l'acétyl-CoA, par exemple, des acides gras, des caroténoïdes, des isoprenoïdes, des vitamines, des lipides, des (poly)saccharides, des esters cireux, et/ou des polyhydroxyalcanoates, et/ou ses produits de métabolisme, notamment des hormones stéroïdes, la prostaglandine, le cholestérol, les triacylglycérols, les acides biliaires et/ou des corps cétoniques et des compositions pharmaceutiques.

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